Az izoelektromos pont

Az izoelektromos pont (az elnevezések: pI, IEP) - értékét pH-érték (pH) környezetben, egy raj nettó töltése molekulák amfoter elektrolitok (amfolitok) található ebben a környezetben, nullával egyenlő; Ez az egyik legfontosabb meghatározó paramétereket elektrokémiai tulajdonságainak amfolit, például aminosavak és fehérjék, sejtek és szövetek. I. Vizsgálat t. Biol tárgyak, származási ígéretes szempontjából diagnosztizálására számos betegség, t. K. különböző betegségek változás következik be pH-értékeket, amelyek az I. t. Eritrociták és más sejtek, valamint vérplazma fehérjék.

Az „izoelektromos pont” kifejezés nem csak a mobilitás a részecskék (molekulák, kolloid részecskék, szuszpenziók és emulziók, részecskék), hanem a rögzített szerkezeti elemek különféle rendszerek érintkező vizes p-rami. Pl. beszélhetünk I. t. felületének az izom szálacskák, Biol, membránok, és így tovább. n.

Az első alkalommal ez a koncepció vezették be 1899-ben Hardy (W. Hardy), aki azt találta, hogy sav p-PAX fehérje részecskék mozognak az elektromos mező a katód felé és így szállítására pozitív töltések, és az alkáli-PAX p - anód t. e. negatív töltésű. Feltétel, egy rum fehérje elektromosan semleges részecskék, hívták izoelektromos állapotban, és a megfelelő pH-érték a közepes - I. t.

Elmélet izoelektromos állapotban amfolit először fejlesztette Michaelis (L. Michaelis) 1918-ban és a módosított Bjerrum (N. Bjerrum) 1923 szerint Bjerrum elmélet amfolit molekula (lásd.) A izoelektromos állapotban szinte teljesen disszociált, és a p- D formájában bipoláris ionok fehérjéket, ami lehet a sematikus képletű + NH3RCOO-, ahol R - polipeptid-láncot. Bipoláris I. t ion. Legyen egyenlő számú elemi pozitív és negatív töltések, és ezért, mint egész elektromosan semleges részecske. Ha hozzáadjuk a p-py-, hogy erős hidrogén ionok kialakítva kombinálni annak COO- csoportok és a fehérje részecskék válnak pozitív töltésű: + NH3 RCOOH. Ha hozzáadjuk a p-py erős lúg + NH3 lehasad hidrogén ionok, amelyek kötődnek a hidroxil ionok egy alkáli, alkotó vízmolekulák, és a fehérje részecskék töltése negatív lesz: NH2 RCOO.

I. m. Meg kell különböztetni a isoionic pont (IIT) fehérje, azaz. E. PH értéke az ilyen közegben, K-beállított hidrogén-ionok száma a savval hasítható csoportok a fehérje molekulák megegyezik a hidrogén-ionok száma, kötődnek bázikus csoportokat. Az értékek a I. m. És IIT egybeesik csak azokban az esetekben, ahol a tiszta fehérje vizes p-D, amely nem tartalmaz semmilyen más ionok, továbbá a hidrogén és hidroxil. A só a fehérje R-PAX számértékek azt I. t. És IIT különböző, t. K. A felelős fehérje részecske határozza meg nem csak ionos csoportokat a fehérje részecskék, hanem a só ionok, amelyek adszorbeálni egy fehérje.

A mennyiség I. m. Függ relatív tartalma savas és bázikus csoportokat a fehérjemolekula, valamint a nagysága a disszociációs állandók e csoportok. A növekvő számának aránya a savas csoportok száma főcsoportok I. t értéket. Csökken, és a növekedés a disszociációs állandók a komponensek, valamint a csökkenése a savas csoportok a disszociációs állandók növeljük. Fehérjék denaturálása a I. t. Emelkedik. I. t. Fehérje lényegében független annak koncentrációja a p-re.

Tulajdonságok amfolitokat az izoelektromos állapotban eltérő tulajdonságaik alapján a pH, nem releváns I. t. Így pl. fehérjék H. t. nem rendelkeznek elektroforetikus mobilitás (cm. Electrophoresis), minimális hidratáció, oldhatóság és stabilitás (amely széles körben használják a fehérje frakcionálás kisózással), viszkozitás, az ozmotikus nyomást, villamos vezetőképesség, duzzadásának mértékét, a fajlagos optikai forgatóképesség. gélesedés sebességét és sózás végre I. t. maximumot. Hasonló tulajdonságokkal I. t. Rendelkezik sejt protoplazma, alapján egy raj tartalmazhat fehérjeszerű anyag. Ismeretek I. t. A fehérjék és más polimer amfolit elengedhetetlen a fejlesztési módszerek azok elválasztási és tisztítási.

A legközvetlenebb és pontos módszert meghatározására I. t. Protein egy mérése az elektroforetikus mobilitás p-pufferben rah egymást követően változó pH-értékek. Ahol két szomszédos értékeket meghatározott pH, az egyik, amely a fehérje részecskék mozgatjuk az anód felé, míg a másik - a katód. Átlagos értékek közül kettőnek a megfigyelt pH határoztuk meg az I. t.

A 2. felében a 20. században. Mérés I. t. A különböző proteinek széles körben használt eljárás, izoelektromos fókuszálás (cm.) A következő szintetikus hordozó amfolit. Közvetett, kevésbé pontos módszer, I. t. E mérés alapján a oldhatósága, duzzadóképességét, kisózással küszöbérték, és egyéb tulajdonságait, azzal jellemezve, izoelektromos állapotban szélsőségek. Annak meghatározására, I. t. A szöveteket, sejteket és azok komponenseket széles körben alkalmazzák Pishinger módszerrel (A. Pischinger), mérésén alapuló szín intenzitását a vizsgálati tárgy bázikus és savas színezékek szekvenciális változása a pH-érték a közeg egy Swarm vizsgált tárgy. Görbék színváltozás intenzitása metszik pH, megfelelő I. t.

PIT-t hozzáadunk egy vizes protein r-ra tiszta fehérje, hogy a P-keretek az erős-te (vagy lúgos) rendelkezik fokozatosan változó pH¹értékeken majd mérjük a műszak előforduló ezen a pH. PH-érték p pa, K-értékét nullára, ez a váltás felel ITI fehérje.

Irodalom: Ashmarin P. és Dr. Protein Chemistry, Part. 1, JI. 968 i; Fehérjék, jód, vörös. H. Neurath és K. Bailey Lane. az angol. Vol. 2, p. 475 és munkatársai. M. 1956 refs.; F és u p o és p F. Kémia és fehérjék funkciójának, Acad. az angol. M. 1965 refs.; M és egy árok-PV Fizikai és kémiai tulajdonságai sejteket és módszerek a tanulmány. L. 1948 refs.; P C-N és GI Izoelektri-cal példány sejtek és azok változásait a normális fejlődés és patológia, Phys. Sovr, biol. t. 22. 2 (5), p. 247 1946, refs.