Meghatározása az izoelektromos pont
A fehérje molekulák szabad karboxil-és amin-csoportok, így lehet disszociált sav és egy bázis t. E. amfoter elektrolitok.
A lúgos oldatot elnyomta a disszociációs az amin csoportok fehérjék negatívan töltött molekula, és úgy viselkednek, mint anionok.
A savas közegben, ami elnyomása disszociációja a karboxilcsoportok, pozitív töltésű fehérjéket, azaz a Ezek kationok.
Egy bizonyos az oldat savasságának, amely az úgynevezett izoelektromos pontú (IEP) a protein molekula egyenlővé pozitív és negatív töltések, válik elektromosan semleges. A helyzet az izoelektromos pont függ a tartalmát és természetét a bázikus és savas csoportok a fehérjemolekula. A legtöbb növényi fehérjék IEP van egy gyengén savas közegben.
A izoelektromos pontja a fehérje rendelkezik a legalacsonyabb oldhatósága és könnyen kicsapódik alapján hatások, amelyek csökkentik a hidratációját a molekulák (azzal a kiegészítéssel, szerves oldószereket vagy sói). Amikor ezt a fehérje-molekulák egyesülnek, alkotó nagyobb részecskéket, és kiesik az oldatból csapadék formájában.
Előállítása 1. fehérje megoldásokat. A kapott fehérje készítmények figyelembe mintát 0,25 g lombikokban öntjük 5 ml 0,5 N. SN3SOONa oldattal és melegítéssel feloldunk vízfürdőben. Ezután a térfogatot vízzel 25 ml-re.
A készített oldatokat használtunk, hogy meghatározzuk az izoelektromos pont a fehérjék. Összehasonlításképpen, mi is használt tojás fehérje 10-szeresére hígítottuk vízzel és szűréssel két réteg gézen.
2. meghatározása IEP. A 8 csövet számozott Pipettázzunk 1 ml fehérje-oldatot öntöttünk vizet és 0,01 N. vagy 0,1. ecetsavas oldatot kolichestvah.Zatem öntünk mindegyik csőbe 2 ml aceton vagy olyan alkohol, a lombik tartalmát keverjük, és állni hagyjuk 30-40 percig szobahőmérsékleten. Olyan pH értéken vagy annak közelében a fehérje pI, az oldat zavaros lesz, és kicsapódik. Táblázat figyelmét az intenzitás csapadék, vagy annak hiánya. Ezen eredmények alapján arra a következtetésre jutottunk a helyzetét az izoelektromos pont a fehérjék elemezték.
Anyagok és berendezések: 0,5. nátrium-acetát oldatot (68,5 g SN3SOONa.3N2O 1 liter), 0,1 n. CH3COOH oldatot (6 ml jégecetet vízzel hígítjuk fel egy literre) 0,01 n. CH3COOH oldatot való hígításával állítjuk elő 0,1 N. CH3COOH oldatot 10-szer, etanol, aceton, tojás fehérje, magvak gabonafélék és hüvelyesek, vagy izolált ezen fehérjék, fiolák, mérőlombikban 25 ml, állványok.
Kapcsolódó hírek: