Meghatározása az izoelektromos pont a fehérjék - studopediya
Szétválasztása albumin és globulin fehérjéket tojás belka.Vysalivanie
Kisózás utal, hogy a folyamat izolálása fehérjék vizes oldatai semleges sók tömény oldatok alkáli és alkáli földfémek. Hozzáadásakor nagy koncentrációban tartalmaz sós a fehérje oldathoz dehidratálást fehérje részecskék és a töltés eltávolítása, a fehérjék kicsapódnak. A mértéke elvesztése fehérje a csapadékot függ ionerősségét kicsapószert, a részecske méret a fehérjemolekula, értékét a töltés, a hidrofilitás.
Más fehérjék kicsapódnak különböző sókoncentrációk. Ezért, a csapadék kapott fokozatos növelésével a sókoncentráció, az egyes fehérjéket találtak különböző frakciók. Kisózás fehérjék reverzibilis, és eltávolítása után a sók protein visszanyeri természetes tulajdonságait. Ezért sózás használják a klinikai gyakorlatban szétválasztására vérszérum fehérjék, valamint az izolálását, tisztítását különböző fehérjék.
A vizsgálati anyagot. tojásfehérje.
Felszerelés: kémcsövek, pipetták.
Előrehaladás. A pour 20 cső csepp hígítatlan tojás fehérje, azonos térfogatú telített ammónium-szulfát-oldat, a tartalmat kevertettük. Ez szerez félig telített ammónium-szulfát, a csapadékot tojás globulin. 5 perc múlva a kivált csapadékot kiszűrjük. A szűrletet egy másik fehérje, - tojásfehérje. A sózás albumin a szűrlethez hozzáadunk ammónium-szulfát port őröltük, amíg a teljes telítettség, azaz mindaddig, amíg már nem só oldódást. albumin csapadékot kiszűrjük, és a szűrletet csinál egy biuret reakció. Negatív reakció hiányát jelzi a fehérje.
Távolság. Az eredmények bekerülnek az asztalra.
A kisózási A fehérjék kicsapása
Az izoelektromos pont egy konkrét értéke pH, ahol a fehérje formájában van semleges molekulák (azok izoelektromos állapotban) hordozó azonos mennyiségű pozitív és negatív töltések. Más koncentrációjú hidrogén-ionok az oldatban előnyösen mind pozitív, mind negatív ionok fehérje. Megoldások a fehérjék izoelektromos pontja a legkevésbé stabil, és könnyen kicsapódik.
A legtöbb fehérje, az izoelektromos pont közel van a semleges körülmények között, de nem esik teljesen egybe vele, számos fehérje, hogy eltolódik a savas oldalig, és Egyes proteinek izoelektromos pontja egy enyhén lúgos reakciót a közeg. Meghatározása az izoelektromos pont lehet csökkenteni meghatározzuk a pH, ahol van a legtöbb gyors és teljes elvesztése fehérje a csapadékot.