ELISA elemzése - kapcsolt immunoassay vérvizsgálat, amely egy átirat, a diagnózis és hogyan

Immunszorbens vizsgálattal (ELISA) - egy modern módja felismerni azt a nagyszámú kórokozók alapul, hogy az emberi szervezet termel az úgynevezett antitesteket termeltek válaszként a kimutatására idegen anyagok - antigének.

Jelenleg ELISA vérvizsgálat használt:

• diagnosztizálására több STD-k;
• azonosítani hajlam az egyes betegségekre által okozott öröklés;
• azonosítani egy bizonyos szakaszában a betegség;
• figyelemmel kíséri a kezelés hatékonyságát.

Például, széles körben elterjedt, ez a módszer kapott a diagnózis az alábbi betegségek:

Ami az általános orvosi gyakorlat, ebben az esetben az enzim immunoassay vérvizsgálat segítségével:

• azonosítani endokrin betegségek, mint például a cukorbetegség;
• értékeli a valószínűsége a stroke vagy szívinfarktus;
• megérteni, hogy mennyire jól a rendszerek a test;
• jelenlétét tárják fel, allergiás reakciók;
• munkájának értékelése az immunrendszert
• értékelje a feltétele a reproduktív funkciók a szervezetben.

Anyaga a tanulmány ebben az esetben lehetnek vénás vér vagy folyadék a csomagtartóban a gerincvelő, az üvegtest váladék, magzatvíz.

Immun és enzimes reakciók

Amint egyértelműen következik a név, a vér ELISA elemzés magában foglalja a több összetevő, nevezetesen - az immunrendszer és az enzimatikus reakciók.
Az immunválasz lehetővé teszi a sejt kötődni sejtek és a kórokozók és az enzim lehetővé teszi, hogy láthatóvá és értékelje az eredményt az előző reakcióból származó.

Tekintsük mindegyik reakció részletesebben.

Mi immunválasz?

Az úgynevezett immun specifikus válaszok, amelyek lehetővé teszik, hogy az antigén az antitesthez, és hozzon létre egy immun komplex. Mit jelent ez? Először, meg kell érteni, hogy bármely sejtfelszíni tartalmaz molekulákat, amelyek tartalmaznak az adatokat a cella, az úgynevezett antigének, és vannak osztva:

Egyes antigének, annak ellenére, hogy némi hasonlóság, ott is sok különbség. Rendelkezésre állnak egy adott szervezetben, és soha nem ugyanaz a többiek. Specifikus antigének megtalálható élőlények bizonyos fajok élőlények. Például, majmok, lovak és kutyák a saját, nem számít, mit nem szeretnek antigént. Ezért az ilyen típusú antigének által használt az immunrendszer felismeri a saját és más sejtek, amelyek szigorúan véve, ez az alapja az enzim-kapcsolt immunoassay vérvizsgálat.

Hogyan ismerhető fel antigéneket? Itt minden teljesen világos. Leegyszerűsítve a sejt, amely immunis a fogások ketrecben, hogy okozott neki „gyanú”, és összehasonlítja azt az antigént a memóriában a meglévő leírást. Ha az antigén merültek fel kétségek sejtek felel meg, az immunsejtek „elengedni”, és megy tovább. Ha a leírás más, a szervezet válasza a fenyegetés az egyik - megsemmisítés. Továbbá elismerése az „ellenség” ebben az esetben megegyezik közel 100%.

Mi egy olyan antitest?

Biológiailag antitest, amelynek nagy jelentősége, ha az ELISA-módszerrel egy speciális molekula létezik-e az immunsejtek felszínén, és amely lehetővé teszi, hogy ez utóbbi a kapcsolatot antigénekkel megkérdőjelezhető mikroorganizmus. Ez egy antitest szolgál útmutató adatokat kockázatelemzési, és hogy megkapja a jelet, amit kétséges ketrec - neki vagy külföldi. Ha az elfogott sejt „saját” antigén ellenanyag gyárt és kibocsátja a „szeretője”.

Miért van szükség immunkomplex?

Mint említettük, egy kicsit korábban, az idegen sejtek felismerésében az antitest nem hagyja idegen antigén. Éppen ellenkezőleg, a küldött bizonyos jelek arra kéri a segítséget „megerősítés”. Ebben az esetben beszélünk, hogy az összes többi antitest található másik része a cella, amely immunis, elkezd mozogni a területen jelez veszélyt, és megkötik magukat egy elfogott antigén, rögzítése és veszi körül minden oldalról. Miután az antigén lesz teljesen körülvéve, akkor kezdődik a megsemmisítése külföldi mikroorganizmus.

Antitestek, hogy feltárja az ELISA diagnosztikai vannak fehérje szerkezetek - immunglobulinok osztva típusok:

Azonban a diagnosztikai venni csak egyféle típusú antitest, amely a leginkább különleges az ismeretlen mikroorganizmus. Jellemzően, az ilyen antitestek faj IgG és IgM.

Mi az enzimatikus reakció?

Ez az úgynevezett enzimatikus reakció lehetővé teszi az egyik anyagból a másikba viszont. Egy anyag, amely jár a vérben ELISA tanulmány az úgynevezett „szubsztrátum”, és a kapott anyag az enzim az úgynevezett „reakciótermék”. Ezen túlmenően, a funkciók ennek a folyamatnak a befolyásoló egy adott enzim kizárólag egy adott szubsztrát. Ilyen enzim tulajdonságai határozzák meg a „saját” a szubsztrátum az úgynevezett „affinitás”. A fentiek alapján, rendkívül világos, hogy minden egyes enzimmel kapcsolt kizárólag az egyik, hogy specifikus kizárólag a választ.

Meg kell jegyezni, hogy a diagnosztikai eljárás alkalmazását foglalja magában IFA nem több, mint tíz fajta enzimes reakciók, amelyek következtében képződött kolorirovannye anyag, amely lehetővé teszi, hogy használja koncentrációjának meghatározására a szer kémiai reakció módszerrel - kolorimetria.

Mi színmetrika?

Kolorimetria - mérésére szolgáló eljárás a az anyag koncentrációja attól függően, melyik a színező oldat sűrűsége, utalva a használata kifejezetten ez a készülék - koloriméter.

Továbbá, ebben az esetben két változata szín sűrűség koncentrációjától függően az oldat:

• egyenesen arányos;
• fordítottan arányos.

Az első esetben a színe az oldat sűrűsége növelése útján fokozott koncentrációja a második oldat azonos színezés sűrűsége csökken a növekvő koncentráció. Technikailag ez a következőképpen történik. Többet vett megoldások, anyagok, amelyeknek egy bizonyos koncentráció, a méréseket a sűrűsége, majd épít fel egy grafikonon a szín sűrűsége az oldat koncentrációja. színező sűrűsége a vizsgálati oldatot ezután mérjük, és a menetrend épült egy pontos értékét a koncentráció, amely összhangban van a mért színes oldat sűrűsége.

Mivel a mérésre használt után egy kalibrációs koloriméterei képes felépíteni egy kalibrációs görbe marad a memóriában, és lehetővé teszi számukra, hogy működik az automatikus üzemmódban. Meg kell jegyezni, hogy az ELISA vérben, általánosan alkalmazott enzimek, például avidin, a peroxidáz és alkalikus foszfatáz.

Módszerek ELISA

Attól függően, hogy az eljárás elvégzése EIA vizsgálat van osztva előre és hátra. Tekintsük az egyes módszerek részletesebben.

Mi az a „közvetlen kapcsolt immunoassay„?

Közvetlen enzim immunoassay használatával jár antitestek egy meghatározott antigénhez kapcsolódik egy speciális jelet, amely a reakció szubsztrátja hordozó enzimes jellegét. Ennek megfelelően, a közvetlen ELISA - egy elemzést a légtelenítő beteg biológiai anyagot helyezünk a mérőhelyekbe, majd az antigén elleni antitest a betegség.

Így, az észlelési szifilisz antitesteket adunk a lyukakba elleni szifiliszes antigének előállítása során kapott és vásárolt a laboratóriumban. A kapott elegyet a szükséges idő, hogy rögzítse antitest „a” antigén. Továbbá, mint azt korábban említettük, antitestek reakciójának beindításához, és kötődnek egy adott címkével.

Mivel az antitestet adunk sok, nem mindegyik lesz képes megragadni az antigén esetén a helyszín a mintában. Annak érdekében, hogy megszabaduljon a felesleges antitestet, a folyadék ömlött a lyukakból. Az antitestek is kötődik a antigének a felületen. Ezután folytassa a második része a elemzés ELISA - enzimes reakciót. Az enzim-oldatot adunk a lyukakba, és marad ott fél órán vagy egy óra. Természetesen, a címke hasonló a hozzáadott enzim, az antitest kötődése. Végén a reakció a jól olyan anyag, amelynek szerzett megfelelő színárnyalatot.

Színes anyagot vizsgált koloriméter. Továbbá, mivel a címke áll rendelkezésre a jól, már érintkeztetjük az antitest koncentrációja a képződött színező anyag lesz megfelelnek ellenanyag-koncentráció, hasonló méretű a számos antigén. Így az elemzés lehetővé teszi számunkra, hogy megértsük, hogy mennyi az észlelt mikroorganizmusok vagy hormonokat tartalmaz a vett mintából.

Mi közvetett enzimes immunológiai?

Közvetett vérvizsgálat EIA végezzük 2 fázisban. Az első szakaszban használt jelöletlen antitestet adunk, hogy meghatározzuk a kívánt antigének, és a második - jelölt antitest a jelöletlen primer ellenanyag. Ezáltal lehetőség van, hogy végezzen kettős ellenőrzés a reakció:

• antitest kommunikálni a antigénnel;
• ezek az ellenanyagok kötődnek az antitestek kötődnek az antigénhez.

Az elemzés az alábbiak szerint végezzük. A beteget az a biológiai anyagot töltünk a lyukakba és a bal mindaddig, amíg a antigének nem kell betartani a felületükön. Ezután hozzáadtunk jelöletlen antitestet, és elhagyta a szükséges idő, hogy a kapcsolatot a rendelkezésre álló antigéneket helyezve a kívánt immunkomplex. Miután az összekapcsolási folyamat befejeződött, a felesleges antitestet eltávolítjuk ömlött a folyadékot a kutak.

A folyamat végén, a következő veszik antitestet (jelzett), adunk a lyukakba és a szükséges idő egy olyan komplex képződését 2 antitestek és azok antigént. Az oldatot ezután öntjük a (annak érdekében, hogy eltávolítsuk a nem kívánt antitesteket).

A következő lépésben egy közvetett ELISA elemzését a vér bevezetett enzim alakítja át „címkék” egy anyag, amelynek a színe. Színes fejlődés ebben az esetben öt percig tart, hogy fél óra alatt. A szín kifejlődése után termelnek kolorimetria és a koncentrációt az oldat színe. Mivel ez az érték ebben az esetben megfelel a koncentrációja antitestek címkék, amely egyenlő az antigén koncentrációja a vizsgálat végére kap egy ötletet a mennyiségi tartalma a kórokozót.

Hogyan dekódolt vérvizsgálatok ELISA?

A mai világban az orvostudomány átirat az ELISA-vizsgálat a vér nem csak diagnosztizálni a betegséget, hanem megérteni, milyen állapotban található a típusú antitest van jelen a pillanatban, a szervezetben. Ily módon csak az egyik elemzés meghatározza a akut vagy krónikus betegség stádiumától. Például, a jelenléte IgM antitestek azt jelzi, hogy a betegség akut szakaszában az áramlás.

Ez a fajta antitest után azonnal jelentkezik a fertőzés, és a test csak egy beteg ember. Ezután IgM antitestek eltűnnek. Így a jelenléte ezen antitestek szükséges közvetlenül hozzárendelni kezelést.

A antitestek jelenlétét lg G, jelennek meg a testben, miután a személy visszanyert, és tartotta, hogy minden alkalommal, a kezelés nem szükséges annak a ténynek köszönhető, hogy csak beszélnek a folyamat, szerzett krónikus formája. Az antitesteket az ilyen típusú egyfajta markert, amely a beteg szenvedett egyszer ezt a betegséget, és volt a hordozója egy életre.

Ha kimutatható biológiai anyagok és az antitest IgM, és lg G, dekódolás immunoszorbens assay azt mondják, hogy a beteg volt súlyosbodásához egy krónikus betegség, amely előírja a megfelelő kezelést. Van egy másik típusú ellenanyag - lg A, amely megmondja a akut stádiumában a betegség. Ezek az antitestek megmaradnak a szervezetben 4-5 hétig, és eltűnik a gyógyulás után. A ilyen antitestek jelenléte azt jelzi, hogy a beteg egy potenciális hordozó egy betegség.